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质粒工艺开发

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菌株库建设
 

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差别代次(P1/P5/P10)菌体质粒表达量
 

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一连三批次质粒生长曲线
 

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纯化工艺开发履历
 

1. 三步层析:
1) 凝胶过滤层析,有用去除宿主DNA残留



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2) 亲和层析,去除开环质粒


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3) 阴离子交流层析,去除内毒素

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层析中心历程检测效果

办法 DNA总(mg) 收率 宿主DNA (μg /mg) 内毒素 (EU/mg) 超螺旋质粒纯度 (HPLC法)
凝胶过滤 88.3 NA 5.6 <200 83.91%
亲和层析 67.9 76.9% 1.5 <3.7 91.46%
离子交流 63.0 92.8% 1.1 <0.34 92.46%
 

稳固性研究
 

时间、温度对证粒纯度及含量转变的影响
 
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恒久稳固性研究-纯度(%)
 
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恒久稳固性研究-含量(mg/ml)
 
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